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聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理是什么?一文解释清楚

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是一种可以将具有某种物理或化学特征的样品分离出来的技术。它是等电聚合凝胶电泳(IEF)技术的一种变种,已经广泛应用于分离、分析和组合分析的研究。

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理是什么

PAGE由兩步組成:分子穿越膠凝胶的能力和分子之間的交互作用,構成完整的电泳分析技術。由於使用的電流強度與膠塊孔徑之間的直接關係,PAGE進行小正性蛋白質和大負性蛋白質分析,使用同種膠的尺寸大小不同的膠塊。

首先,PAGE技術將膠塊與固定的电势如電壓正極和負極接地,使样品电流流過膠凝胶,此時样品中蛋白質分子進入膠塊孔隙中,在極性環境中,弱酸性蛋白比强酸性蛋白更容易溶解,在此基礎上,弱酸性蛋白和強酸性蛋白在膠的表面上沉積。然後,膠分子中的分子穿越時,也由於它們之間的交互作用,形成一種拉力,形成一個向前移動的力,使蛋白質沿驱動电势而前進,最終分子在某處卡住不再前進,細胞膜蛋白分子則位於膠膜面。

然后,在形成驅動力的過程中,對於驅動电势兩端,分子沈積的速度也不同,壓力的傳輸也變得不均勻,因此,它就可以通過以下參數得到特定質體的分離:正負電荷、分子量、功能性集群及其他應用環境的要求。

通過上述步驟完成分子定位,可以使样品在膠凝胶中有道分离電泳,此時,膠凝胶表面的蛋白質分子經由側向運動,沿著電源移動,最後,被分離樣品的蛋白分子會在膠凝胶中出現特征性帶跡。分子間的正負電量比對應的分子將會分別紀錄於膠的腹部和背部,而不同蛋白質的分子將分別產生不同表現。

從上述可見,PAGE技術以一種快速、高精度的技術,對具有特定極性、分子量和功能性集群的分子進行分離和分析。這種技術的優勢在於簡單、快速、高效率、安全性能好,能夠有效分离出具有不同特征的样品,并且能夠在有限量的样品中得出可靠的結果。

總的來說,聚丙烯酰胺凝胶電泳(PAGE)是一種簡單可靠的电泳技術,用於快速、高精度地對帶有特定極性、分子量和功能集群的分子進行分離和分析。此技術能夠節省時間、金錢、劳动費用,是生物學研究的重要手段之一。
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