1、第 1 页请阅读本文最后的免责声明基因诊断的分子生物学基础ZHIYIN邮箱：zyzbsz-智银资本行业研究报告2ZHIYIN目录概述1核酸分子杂交技术2PCR及其衍生技术3DNA序列测定技术4第 3 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYIN3请阅读本文最后的免责声明1.1基因诊断：针对性强、特异性好、灵敏度高、应用广泛基因诊断（gene diagnosis）是利用现代分子生物学技术，从DNA/RNA水平进行检测，分析体内致病基因的存在、变异和表达等状态，从而对疾病作出诊断的过程。基因诊断针对性强灵敏度高应用广泛特异性好资料来源：医学分子生物学，智银资本第 4 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYI

2、N4请阅读本文最后的免责声明1.2基因诊断的基本策略（1）对基因突变的检测 点突变的检测：如对已知突变位点进行的产前诊断 大片段核苷酸丢失或插入的检测：如Duchenne肌营养不良的诊断 基因重排的检测：如Burkitt淋巴瘤是8#染色体的c-Myc基因转移至14#染色体的免疫球蛋白重链基因调控区 基因扩增的检测：如乳腺癌中成纤维细胞生长因子基因家族的扩增可达100+拷贝（2）对基因表达异常的检测：主要检测mRNA水平的表达（3）对病原体基因的检测：如HIV、HPV、乙肝病毒等的基因诊断 随着技术的革新和方法的普及，现实中通常采用多种方法联合的检测手段。资料来源：医学分子生物学，智银资本第 5

3、 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYIN5请阅读本文最后的免责声明1.3.1基因诊断的临床应用：遗传病的基因诊断 镰状红细胞贫血（Sickle-cell anaemia, SCA）：常见的遗传病之一，-肽链6#谷氨酸被缬氨酸所代替，构成镰状血红蛋白（Hb-S），替代正常Hb-A。正常携带者患者资料来源：医学分子生物学，智银资本第 6 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYIN6请阅读本文最后的免责声明1.3.2基因诊断的临床应用：遗传病的基因诊断 囊性纤维化：囊性纤维化穿膜传导调节器（CFTR）是一个含有1480个氨基酸残基的蛋白质，对跨膜转运调节起重要作用。CFTR基因突变，可引起呼吸系统、胃肠

4、道、肝胆系统及生殖道等上皮细胞的离子转运异常，最终可致囊性纤维化。CFTR基因存在1000多种突变形式，不同突变形式的诊断对治疗起到重要作用。资料来源：医学分子生物学，智银资本第 7 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYIN7请阅读本文最后的免责声明1.4.1基因诊断的临床应用：肿瘤的基因诊断 检测原癌基因：Ras蛋白是原癌基因Ras的表达产物，是Ras-Raf信号通路的重要成员，该通路被激活可导致细胞增殖。如Ras基因发生突变，使Ras蛋白失去GTP水解酶活性，GTP不能及时水解，该信号通路会持续激活，导致细胞增殖。该突变可引起泌尿系统肿瘤和淋巴细胞白血病。细胞的增殖，存活，区别GTP酶活化蛋

5、白（GAP）Ras-Raf信号通路：配体RPTKadaptorGEFRasRafMAPKKMAPK进入细胞核转录因子资料来源：医学分子生物学，智银资本第 8 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYIN8请阅读本文最后的免责声明1.4.2基因诊断的临床应用：肿瘤的基因诊断 检测抑癌基因：p53基因位于17#染色体，p53蛋白是DNA结合蛋白，也是转录活化因子，在应答DNA损伤时常引起细胞周期紊乱。50%-60%的恶性肿瘤均与该基因有关，检测p53编码区的错义突变、单碱基插入和缺失等变异，可实现癌症早筛。资料来源：医学分子生物学，智银资本9ZHIYIN目录概述1核酸分子杂交技术2PCR及其衍生技术3D

6、NA序列测定技术4第 10 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYIN10请阅读本文最后的免责声明2.1核酸分子杂交技术 核酸分子杂交（molecular hybridization of nucleic acid）是指不同来源的核酸单链在退火（复性）时能以碱基配对的方式重新形成双链。 该杂交反应既可以在两条DNA单链间形成，也可以在RNA与DNA单链间形成，其实质是核酸的变性与复性。 不完全互补的两条核酸单链也能杂交结合，但碱基互补程度越高或互补区段越长，双链之间的结合也就越牢固。（或DNA-RNA杂交双链分子）资料来源：智银资本第 11 页请阅读本文最后的免责声明ZHIYIN11请阅读本文最后